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阿霉素耐藥株燒瓶培養的處理流程

點擊次數:56 發布時間:2022-08-15
   阿霉素耐藥株燒瓶培養的處理程序:
  在培養瓶中接種細胞并在培養基中完全埴充培養基以防止運輸過程中細胞的丟失。
  1.收到后,目視檢查培養物是否有微生物污染的宏觀證據。使用倒置顯微鏡(配備有相位傳感器),仔細檢查是否有微生物污染的證據。還檢查以確定大多數細胞是否仍然附著在燒瓶底部?在運輸過程中,培養物有時被粗略地處理,并且許多細胞經常分離并縣浮在培養基中。
  2、如果細胞仍然附著,無菌去除5至10毫升的運輸介質??梢怨澥∵\輸媒介以重復使用。在5%C的空氣中,在37°C下培養細胞,直到它們準備進行傳代培養。
  3.如果細胞沒有附著,無萄地移除燒瓶的全部內容物,并以1000rpm離心5至10分鐘。取出運輸介質并保存。在10毫升這種培養基中重新沉淀顆粒細胞并加入25厘米的燒瓶中。在空氣中5%°C下,在37°C下孵育,直至細胞準備進行傳代培養。
  阿霉素耐藥株細胞培養小技巧:
  1.買細胞要去靠譜的地方買,比如ATCC或者素冉生物。一般上面會有針對細胞的介紹,這樣培養之前可以了解細胞正常生長的狀態圖、傳代、培養基的類型等。
  2.不管是買的細胞,還是別人惠贈的細胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存,凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養基。
  3.發現細胞有污染迅速處理掉,特別是當你養了很多種細胞時。細菌污染、真菌污染很容易發現,支原體污染的話,細胞會長的慢,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。
  4.不同細胞生長周期不同。有的生長很快,有的又是特別慢,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養細胞的過程中多多摸索。
  5.對于嬌弱的細胞,就得細心呵護。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間。每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況。
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